高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相) 內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中做相對運動時，經(jīng)過反復多次的吸附- 解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。HPLC廣泛應用于生命科學、食品科學、藥物研究以及環(huán)境研究中。 LC-310高效液相色譜儀的儀器本身是記錄樣品通過檢測器時，吸光度的變化而產生的電信號變化，從而產生色譜譜圖，最終的結果就要靠后期的色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
譜圖處理完即可制作校正曲線，校正曲線是數(shù)據(jù)處理的重點，是將標樣譜圖的信息與數(shù)據(jù)做成一個標準，供處理試樣譜圖使用。校正是通過分析指定的準備好的標準樣品，來確定計算絕對組分濃度的響應因子的過程。接下來介紹常用的數(shù)據(jù)處理方法：
1.外標法
外標法是指添加一定量的標準品于空白樣品中制成對照樣品，與未知檢測樣品平行進行樣品處理并檢測，根據(jù)對照品響應值與標準品的濃度函數(shù)關系計算出未知檢測樣品中被測組分濃度的定量方法。
2.內標法
內標法指的是將一定重量的純物質作為內標物加到一定量的被測樣品混合物中，然后對含有內標物的樣品進行色譜分析，分別測定內標物和待測組分的峰面積及相對校正因子，按公式計算出被測組分的含量。
3.兩種數(shù)據(jù)處理方法的區(qū)別
內標法是把標準物質加入到被測樣品中，外標法不是把標準物質加入到被測樣品中，而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定。
1、外標法要求儀器重復性很嚴格，適于大量的分析樣品，因為儀器隨著使用會有所變化，因此需要定期進行曲線校正。此法的特點是操作簡單，計算方便，不需測量校正因子，適于自動分析。但儀器的重現(xiàn)性和操作條件的穩(wěn)定性必須保證，否則，會影響實驗結果。
2、內標法要求挺嚴格的，對于內標物的選擇要有一定的原則，適于分析樣品量較少的情況；不要求樣品里的所有組分都出峰，只要內標物和所關注的組分出峰并分離好就可以了；定量準確，對進樣量和操作條件的控制不很嚴格，但必須準確稱量試樣和內標物，否則會影響實驗結果。
